如何通過分析電泳圖譜來判斷質粒DNA提取物的質量?

時間 2021-05-31 07:09:46

1樓:清華老張

質粒DNA新鮮提取出來就電泳的話,可以跑成多條帶,但是足夠前面的條帶是超螺旋的,量應該最大,而且從分子量上看,顯得比實際大小要小,超螺旋跑得快

2樓:易基因ZXM

一般就是看亮度以及條帶數,將你的質粒DNA電泳條帶和標準DNA樣品(Marker)帶對比,查閱你的Marker說明書,一般是有2種亮度的,不亮的一種是10ng/ul,較亮的是30ng/ul。比如:你的質粒DNA點了5ul,DNA標準品也點了5ul,你的質粒DNA條帶的亮度是Marker亮帶的2倍亮度,那就是30ng/ul×2倍=60ng/ul,所以粗略計算出你的質粒DNA的濃度是60ng/ul。

看條帶數,一般新提的質粒可能有三條帶,DNA的三種構型,可能還會有RNA帶,一般比較瀰散

點樣的時候最好是質粒DNA的體積和Marker的體積相同,這樣好計算,否則還得換算一下。但是通過電泳來判斷質粒質量是一種比較粗糙的辦法,精準測定的話還是要用核酸儀來檢測。

3樓:瘋狂的石頭

看你使用的marker,一般marker說明書裡面都會告訴你上樣多少體積的時候,marker裡面最亮的條帶是多少質量,然後對比質粒的條帶亮度就可以粗略判斷。

4樓:SciLearncer

首先查一下所用marker的規格,即一定體積marker所含DNA的質量,電泳後比較marker的亮度和目的條帶亮度,從而判斷你的DNA提取物的質量。

求助PCR電泳圖怎麼分析?

囧迫雷雷 我們以這副很醜的圖為例,第五條泳道是marker,用來指示DNA大小,電泳必跑,如果PCR產物大小對了,有很大可能性你P出來了對的東西。但是有很多其他問題需要注意,比如 123泳道有不止一條帶並且有瀰散,這種情況的可能原因是DNA量太多,或者產物太大用了不合適的膠濃度。如果瀰散而且條帶還不...

有關質粒瓊脂糖凝膠電泳圖分析?

marker就是這樣的好不啦,不是10000,7000,5000就得間距一樣,你的用的五千多bp的條帶沒有出來,而且有引物二聚體,沒有條帶可以先降低退火溫度,還是沒有,檢查模板是否有降解 可能性小 還是沒有,重新設計引物,擴增使用特異性高的熱啟動酶擴增,能夠避免引物二聚體,提高特異性 1.marke...

求問電泳圖蛋白質的怎麼看?

義翹神州 SDS PAGE跑的帶型不錯,建議marker的上樣量再少一半。如果膠孔有富餘建議把邊上幾個孔道空出,不點樣或只加buffer。如果你只是要確定蛋白質的大小,根據圖二條帶位置找到圖一marker 最左側泳道 的大小就行。還有就是PAGE膠的濃度要一樣,不同的膠跑出的帶型是有區別的,所以,需...