求助PCR電泳圖怎麼分析?

時間 2021-06-05 02:57:38

1樓:囧迫雷雷

我們以這副很醜的圖為例,第五條泳道是marker,用來指示DNA大小,電泳必跑,如果PCR產物大小對了,有很大可能性你P出來了對的東西。但是有很多其他問題需要注意,比如:

123泳道有不止一條帶並且有瀰散,這種情況的可能原因是DNA量太多,或者產物太大用了不合適的膠濃度。如果瀰散而且條帶還不亮,那可能並沒P出來正確的東西。

第4泳道我們發現最底下有超亮條帶是由於過多的SDS引起的,SDS把膠中的染料帶跑了,所以上面的條帶有足量的DNA但是不亮。有時候各種buffer裡面的成分會影響條帶需要注意。

第6泳道就是什麼都沒跑出來。

一般PCR產物跑完會在100bp以下有一條淡而瀰散的條帶,是引物二聚體,P很小的產物時需要注意不要弄混。

有時候有很多條帶只有一條大小是對的:說明引物特異性不好,需要重新設計或者提高退火溫度。

在正確條帶倍數大小出現條帶:說明overamplify了,可能引物的量不夠。

2樓:「已登出」

PCR電泳圖的話就是比大小,跑乙個marker,marker說明書是標識了每天帶的大小的。然後對比你的產物條帶與marker接近的條帶,看看大小對不對。

有關質粒瓊脂糖凝膠電泳圖分析?

marker就是這樣的好不啦,不是10000,7000,5000就得間距一樣,你的用的五千多bp的條帶沒有出來,而且有引物二聚體,沒有條帶可以先降低退火溫度,還是沒有,檢查模板是否有降解 可能性小 還是沒有,重新設計引物,擴增使用特異性高的熱啟動酶擴增,能夠避免引物二聚體,提高特異性 1.marke...

求問電泳圖蛋白質的怎麼看?

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