有關質粒瓊脂糖凝膠電泳圖分析?

時間 2021-10-26 15:27:05

1樓:

marker就是這樣的好不啦,,不是10000,7000,5000就得間距一樣,你的用的五千多bp的條帶沒有出來,而且有引物二聚體,沒有條帶可以先降低退火溫度,還是沒有,檢查模板是否有降解(可能性小),還是沒有,重新設計引物,擴增使用特異性高的熱啟動酶擴增,能夠避免引物二聚體,提高特異性

2樓:

1.marker 本身是沒問題的,它在電泳中不是線性關係,或者沒有線性這種說法,條帶越大相同大小的bp差間距會越小。

2、3.不是你提的質粒不純,你根本不能用乙個線性的marker去標示乙個擁有好幾種基因結構的質粒大小,正常提好的完整的質粒是有3條帶的,同一質粒DNA其超螺旋形式的泳動速度要比開環和線狀分子的泳動速度快這些都不重要,如果想要通過這種marke去標示質粒的大小,最好的辦法就是將質粒進行單酶切,酶切完全拿去跑電泳就是一條帶,不完全的話可能還是幾條帶。

4我記得提取完的質粒前面不應該會有這麼明顯的條帶。

剛開始課題吧,很多東西問問師兄師姐,自己琢磨費時費事,都是經驗的東西

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