求問電泳圖蛋白質的怎麼看?

時間 2021-06-03 02:48:15

1樓:義翹神州

SDS-PAGE跑的帶型不錯,建議marker的上樣量再少一半。

如果膠孔有富餘建議把邊上幾個孔道空出,不點樣或只加buffer。

如果你只是要確定蛋白質的大小,根據圖二條帶位置找到圖一marker(最左側泳道)的大小就行。

還有就是PAGE膠的濃度要一樣,不同的膠跑出的帶型是有區別的,所以,需要核對圖一和圖二的膠濃度是否一樣。

目測這兩個膠的濃度不一樣,所以圖一標註的marker條帶大小可能是錯誤的,一般10-12%的膠比較難跑出10kd條帶。

還要注意電泳的電壓和膠板的長度。

2樓:ceRNA

第一圖最左邊的第1泳道是marker的電泳圖,根據不同分子量分離,具有多條帶,越下方分子量越小,具體條帶對應的分子量要查詢所使用marker的產品說明,即第二圖。

第一圖從左至右第2泳道為一條帶,第3泳道兩條帶,第4泳道一條帶。第2.3.

4泳道分別有一條帶處於同一水平位置,表明這三個蛋白在同一分子量水平,可能為同種蛋白或多肽,如果第2.3.4泳道使用的是相同的特異性抗體(一抗)顯影,則就是同種蛋白。

第3泳道有兩條帶,下方出現的條帶可能由於抗體特異性原因,和其他蛋白結合導致出現條帶,也可能和相同蛋白不同亞型結合出現條帶。

顏色深淺表示蛋白與抗體結合的量,顏色越深,結合越多,所測蛋白的量越多,當然有軟體可以對顏色深淺進行定量。

3樓:AFKinPEACE

SDS-PAGE是將蛋白變性後通過分子量的大小區分的方式,你圖上的marker也就是可以提供你參照用的已知分子量蛋白。你可以通過貨與已知分析量的marker 比對,確定你所要看的樣品中的蛋白分子量大小。

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