為什麼引物設計用的是CDS序列而不是基因組序列?

時間 2021-05-06 14:09:11

1樓:丙隊長

你的問題沒有描述,但是用cds而不是基因組序列,感覺你問的是「做qPCR驗證表達量的時候『為什麼引物設計用的是CDS序列而不是基因組序列?』」。

如果我的猜測是對的,那麼問題的答案是,看表達的時候,是用mRNA來檢測的。而成熟的mRNA裡被認為是沒有內含子的。這時候如果想設計出擴增產物長度合適的引物,就必須用實際的模板序列,也就是mRNA的序列。

2樓:水痕

先問是不是,再問為什麼。

實際情況不是一定要用CDS設計的,不過確實這樣最為常見?。

其實用CDS作為引物設計的位點優勢在於其受到選擇壓力較大,因而序列較為穩定,因而引物比較容易能擴出來。

那個說搞內含子沒用的答案顯然是錯誤,因為用CDS作為引物設計位點可以且會擴出內含子,只要引物之間跨越了內含子。

3樓:榴蓮生煎

看情況,就想表達個蛋白做體外實驗用CDS比較合適(目前認為,發揮功能的蛋白多數為剪接後的形式)

但也有一些實驗,比如在植物裡異源表達後看植物表型的時候更多用的是基因組序列

4樓:正在改名字

不一定啊。如果只是驗證基因的有無,或者做螢光定量,用cds區序列設計引物是對的。可如果是轉殖全長,那最好還是在mRNA的UTR區設計引物,因為這樣可以把內含子包括cds全給了轉殖出來。

用一對引物分別轉殖DNA和RNA,就可以知道該基因的完整序列了。

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