1樓：PassionForLife
PCR當然可以用RNA作為引物，事實上，我們自己的DNA複製很大程度上都是依靠RNA作為引物來實現的。回到你的問題，如果你的目的是為了定量，假設你的設想是完全正確，你的RNA引物切除酶每個擴增迴圈也只切你的RNA引物一次的話，這個也不能使定量更精確，你還是需要標準曲線來確定開始底物的絕對濃度。
更何況：
RNA作為引物PCR的效率會降低，因為現在沒有能像Q5，phusion一樣高效高保真的聚合酶能識別RNA引物的
加入了RNA引物切除酶，酶的kinetic activity會讓擴增定量多乙個不確定性，你如何確保這個酶在整個擴增區間是以相同速率切除RNA的（隨著RNA濃度的降低，切除效率肯定不會是一致的），更何況找到耐熱的RNA切除酶也是一項挑戰
有更多更高效方便的，用DNA為引物的方法能相對或者絕對的為底物進行精確定量（qPCR/dPCR）
2樓：荊軻刺秦舞陽
如果taq酶活性允許以rna為引物以DNA為模板合成DNA的話（這一點我不是很肯定，假設是可以的，不然這個問題的前提就不存在了）。那麼你設計的2n-2可能面臨幾個問題。1.
成本，合成rna比合成DNA貴很多。2.切除是用什麼酶?
怎麼保證游離的引物不會被切掉。3.忽略第二點的情況下，按照你的設想，擴增只存在於採用原始的模板以及第一輪擴增產物作為模板的情況。
第二輪的產物就不能作為模板了，擴增基本上是線性而不是指數，這裡面就遇到乙個問題，這樣做的結果初衷如果是保證準確，其他方式的線性擴增也可以。但是線性擴增存在乙個擴增倍數不夠，造成螢光訊號可能不足以被檢測到的問題……
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