ELISA酶聯免疫吸附測定中,為什麼不能直接用酶連線的一抗進行測定?

時間 2021-05-30 11:03:59

1樓:精品水鍋

如果酶直接連線在一抗上,不用加樣,洗滌後加顯色液都能顯色,明顯的假陽性,還有什麼意義呢

一抗和二抗沒有什麼本質區別,都是針對抗原製備的特異性抗體,但要注意單抗與多抗的區別,一抗和二抗一定不能是同乙個單抗,因為每乙個單抗對同一抗原只有乙個特異性結合位點,若一二抗一樣,二抗就結合不上抗原,失去檢測意義了。滷煮說的這應該是雙抗夾心法,像檢測半抗原小分子物質(農殘獸殘),只能用競爭法測

2樓:周雲橫

舉個例子先說明下這個方法:

不知道題主知道肉夾饃這個東西沒有,ELISA就好比你在板子上固定一層餅,然後再拿肉去鋪它,其中臘汁肉可以特異性的和餅結合,而五花肉培根或者孜然炒肉什麼的不可以,然後就被洗脫掉了,最後拿出另乙個奇特的餅,為什麼它奇特呢,因為它上面寫著「我是臘汁肉夾饃」!這種餅雖然奇特,但是其實不要求它特異性和臘汁肉結合,只要是肉肉其實就可以了,畢竟現在板子上只剩下臘汁肉了,最後洗掉沒有和肉肉結合的帶走「臘汁肉夾饃」標記的餅,然後你數有多少個「臘汁肉夾饃」標記留下來,就知道之前的肉肉裡有多少臘汁肉了。這裡需要考慮的是,有可能你的臘汁肉很少,這樣其實有一些在板子上的餅最終不會有任何肉掛在上面,也不會有「臘汁肉夾饃」的標記了。

(如果完全沒有臘汁肉,那也就不會有臘汁肉夾饃的標記留在上面了)

題主問得這個問題,就好比我用帶著「臘之肉夾饃」標誌的餅先和板子結合,那問題就出來了,第一,既有標記又特意性結合臘汁肉的餅很難做,當然這不是重點,重點是,最後你數有幾個臘汁肉夾饃的餅不取決於臘汁肉的數量了,而是看你在板子上放了多少餅,即便餅和臘汁肉特異性結合,當臘汁肉不夠甚至沒有的時候還會有很多白餅說自己是「臘汁肉夾饃」,拜託你就是個白餅子,你充什麼肉夾饃嘞!!這樣豈不是「掛羊頭買狗肉」……哦,不對,是掛「臘汁肉夾饃」賣一部分臘汁肉夾饃和一部分白餅子,真是黑心商家呀。。。回答完問題肚子餓了是個什麼鬼……

3樓:槑琳

請問...用酶連線的一抗測定.....還有必要測定蛋白了麼......

你不加蛋白照樣有顯色結果啊.......一抗是捕獲抗體而二抗是檢測抗啊,就是為了特異性識別被檢測的抗原啊......也就是蛋白.....

蛋白酶為什麼不水解蛋白酶

蜂蜜餡饅頭 蛋白酶是會水解蛋白酶的 首先,酶是一種具有催化活性的蛋白質,而蛋白酶的得名就意味著它的催化底物是蛋白質 即蛋白酶是一類可以催化蛋白質水解反應的蛋白質 這種催化機制的實現基於酶和底物結構的契合 鎖鑰模型和誘導契合模型 一種特定的酶結構結合催化一種特定的底物結構,所以一種酶可以催化水解一大類...

高中生物的DNA酶,解旋酶,DNA連線酶,還有RNA聚合酶這些有什麼區別?

錯過 1.DNA酶 DNA酶又稱DNA水解酶,是一類水解DNA的酶的統稱,主要作用是水解DNA,斷裂DNA中的磷酸二酯鍵,形成脫氧核苷酸或寡聚核苷酸。高中生物在艾弗里的實驗中提到。2.DNA聚合酶 主要作用是通過形成單個脫氧核醣核苷酸之間的磷酸二酯鍵來形成DNA分子。高中生物在DNA複製和pcr擴增...

限制酶怎麼切割DNA的?

放電的毛衣 首先是空載質粒 我們稱之為Back Bone 與目的基因用相同的酶切 一般來說37 數十分鐘至數個小時 那麼這樣就會有相同的粘性末端。然後用T4DNA連線酶 或者其他粘性末端連線酶 連線,一般來說是先退火,再PCR,最後再連線。再然後就是轉化,熱激感受態細胞和連線後的產物,一般來說這時候...