如何選擇合適的逆轉錄酶 ??

時間 2021-06-16 05:49:19

1樓:

HiReverse Tranase是在M-MLV (RNase H-) Reverse Tranase基礎上經過多點突變得到的全新逆轉錄酶。Hi

Reverse Tranase在50℃下活性最高,且可耐受高達55℃的反應溫度,可用於具有二級結構的RNA模板的逆轉錄。增強與模板的親和力,可獲得更多全長的cDNA,並可檢測到低至1 pg的總RNA,特別適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉錄。此外,Hi

Reverse Tranase的錯配率也比M-MLV (RNase H-) Reverse Tranase有所降低,提高了轉殖的保真度。

HiII Reverse Tranase是在M-MLV (RNase H-) Reverse Tranase基礎上通過體外分子進化技術獲得的全新逆轉錄酶。與上一代的Hi

Reverse Tranase相比,Hi

II保留了極高的熱穩定性,在50℃的半衰期超過240分鐘,並可在55℃長時間反應而保持穩定,非常適合具有複雜二級結構的RNA模板的逆轉錄。此外,Hi

II增加了多個點突變,進一步增強了模板親和力和行進性,使得全長cDNA的合成能力有了大幅度提公升,可獲得長達20 kb的全長cDNA,並且對於常見的逆轉錄抑制物具有更高的耐受度,非常適合於植物組織RNA的逆轉錄反應。

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