1樓：Yunlong JIA
請問關於訊號採集的話，是每合成乙個鹼基就採集一次訊號，是同時一下次全部採集flowcell上的訊號，還是每個tile這個掃瞄呢？
2樓：
沒錯，就是乙個洞。他的剖面圖是這樣的：
裡面就是乙個洞，簡單到爆。這個洞中間是有乙個向內突出的結構的，是洞最窄的地方，圖里也是可以看出來的。這個分子有乙個神奇的性質，就是會自動的鑽進磷脂雙分子膜
紅的就是磷脂分子，我不會畫大家發揮想象力= =
然後腦洞大開的某某科學家就開發了乙個體系
左右兩個小池子，裡面放上電解質溶液。兩個池子中間有乙個非常非常小的洞，洞上貼著細胞膜。把剛才做好的通道蛋白類似物丟進去，就會自己插在膜上，就像上圖所示，形成了乙個「兩個池子由乙個通道蛋白的洞連著」的結構。
把乙個DNA分子丟在一邊，加電壓，測電流。
然後DNA就鑽進去啦！雖然我不懂為啥，大概是因為DNA本身帶電，然後就做成了乙個微型的電泳吧= =。而且鑽進去的是單鏈的DNA，通道是裝不下雙鏈DNA的，DNA在進到洞裡之前解旋了。
精彩的部分來了：單鏈DNA鑽進了洞裡，各個核苷酸就會逐個通過洞裡最窄的那個口。窄口比鹼基大一點，就會留下一點空隙讓電解質中的離子通過空隙。
四種鹼基大小不同，留的空隙大小不同，電解質離子通過的速率就不同，上上圖中電流錶的示數就不同。於是乎，電流錶顯示的不同電流大小就對應著不同的鹼基通過了窄口！！！
然後就有了這麼一張圖，不同的電流大小意味著不同的鹼基。
用標準的，單一鹼基的序列跑幾遍，就知道了鹼基和電流的對應關係，測序就開始了！
一條DNA！丟進去跑一圈！序列就全都搞定了！
不要PCR，不要998，只要一條DNA！！
天才之作！天才之作！天才之作！
不過現在還是有一些問題的，比如說單分子操控的技術成本太高，比如DNA總是在測到一半的時候斷掉= =，但是不得不說這個想法真是，remarkable！
好像有點跑題？無所謂啦！
還有！如果誰找到了原文獻，懇請您發給我~~~非常感謝！
大概就是這樣，吐槽我畫畫不好的
我女朋友畫畫好啊嘿嘿嘿~~~~~~
3樓：吳鏑
和PCR有關係啊。單分子DNA產生的訊號（無論是螢光訊號還是電訊號）難以被當前技術精確的捕獲，所以需要預先對每條DNA進行擴增使其增加到一定數量（通常需要擴增幾萬到幾十萬倍），將這些訊號集中在一起進行測定，以達到較高的準確度。
以Ion Torrent測序平台為例，其通過檢測鹼基互補過程中釋放氫離子引起的pH值改變進行測序，而乙個DNA分子釋放的氫離子難以被檢測到，所以要提前用PCR將其擴增，這樣一次反應就可以釋放出幾萬到幾十萬個氫離子，這就可以被檢測到了。
4樓：Xi Yang
蟹妖。最日常的Sanger測序是基於類似PCR的反應的，反應體系裡加入一定比例的雙脫氧並帶螢光的ddNTP。反應使用單向引物，從同乙個位置起始，如果乙個分子在這一步加上的是ddNTP，那它就不會繼續延伸了。這樣產生的一系列不同長度的產物，都帶有停止反應那個位置的鹼基所對應的螢光標記。
然後產物拉個單鹼基分辨能力的電泳，每個位置的螢光顏色對應於它的鹼基型別。
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