為什麼CRISPR Cas9容易脫靶?

時間 2021-05-07 20:11:34

1樓:源井生物

脫靶的產生是因為gRNA識別錯了的鹼基序列。容易脫靶應該是設計的gRNA不好,打靶到了別的同源區。其實在gRNA設計階段就可以很大一部分的脫靶可能性。

再配以後期陽性轉殖的高危位點測序脫靶分析,可以將CRISPR的脫靶效應控制的很好。

2樓:百瑞生物科研團隊

博主你好!

Crispr/cas9的是目前應用最廣泛的也是效率最高的第三代基因編輯技術。

當然他的缺點是一步步慢慢的被攻克的。

脫靶的問題,這裡需要詳細和你講解的就是cas9蛋白若和目的基因病毒在乙個載體上的話脫靶率是很高的。我們實驗室目前均採用的是雙載體,先由cas9蛋白的載體篩選完後,再上目的基因載體的病毒,這樣的效果會更好一些。

3樓:zengqtan

因為就算sgRNA和靶基因不是完全匹配,也有可能結合上去,招募cas9過去把靶基因切斷,利用修復機制使該基因發生如移碼等突變,最後使非靶基因沉默,產生脫靶。

另外,sgRNA是很短的,20-30nt,極有可能以完全配對的形式結合到與靶基因相似的其他基因上,產生脫靶。

題外話,由於脫靶效應未得到完美解決所以這項技術還只能停留在實驗階段,並不能進行醫療等人體實驗,因為如產生脫靶,可能把一些生命活動相關的基因敲除,產生可怕的後果!

4樓:

因為你把這一問題的答案寄希望於知乎而非自己。

最後,瀉藥。但能不能以後生物方面的不要邀我了,最後廁所和飼料方面也不要邀我了。。。

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