在基因工程中既然檢測出細胞可以表達相應的蛋白質為什麼還要在分子水平上檢測基因是否插入?

時間 2021-06-10 06:34:47

1樓:yang

檢查的時間點不一樣呀,總不能做到最後直接看蛋白有沒有吧,沒有咋辦,從頭再來?

DNA一般是做質粒的時候檢測吧,這時候實驗剛剛開始,測了不行,重來的成本很低呀

rna應該是轉染以後測吧,qpcr怎麼也比western快一些吧,而且萬一western沒區別,你說你是沒轉進去呢還是沒表達呢?

實驗需要一步一步的驗證,沒走一步都要知道是不是成功了,這樣出現問題的時候才容易找出問題,解決問題。

2樓:

上面三個回答都不對點,@Kao.Kuo (你回答的太高深)

這個問題我用另乙個問題來解決:當你只在蛋白質水平檢測時,如果沒有相應產物蛋白,怎麼辦?

還要補充乙個你沒有問到的,為什麼還有個體水平的檢測?為了解決我補充的問題,請問如果蛋白質水平檢測到了相應的蛋白質,個體就一定會出現想要的性狀嗎?

3樓:

沒有專門查資料,單純從工作經驗說幾點。

第一,如樓上所說,基因好檢測,測序很快出結果;蛋白不好檢測,需要先純化,再根據蛋白的性質去做鑑定,比如UV-Vis,SDS_PAGE,以及現在依然昂貴且相對費時的蛋白測序。

第二,強調的基因工程的上下游連貫性。基因工程強調的是在基因水平的調控實現對後續基因表達以及更下游的細胞性質的調控。如果你進行了基因操作,卻無法在基因水平證明該操作,那麼蛋白的表達邏輯上就無法與基因操作吻合,也就是變數和應變數之間的關係無法成立,這也就是為什麼你自己提到的,DNA,mRNA,以及蛋白三個水平驗證,因為這符合基因-轉錄-翻譯的遺傳資訊傳遞法則。

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