1樓:傲嬌的小崽子
標記基因是可以跟基因表達載體中的目的基因結合,而且有特異性,即只能跟目的基因結合,不能跟基因表達載體中的別的基因片段結合。所以可以通過這種方式來確定質粒中含有目的基因。
2樓:小青炒
標記是為了說明轉導。取決於標記表達方式,如果目標基因和標記基因受同一套啟動子和終止子調控,則標記表達可以理解為目標基因的表達。
啟動子到終止子之間可以有不止乙個基因,甚至可以是許多個基因組成的基因群。
如果標記基因和目標基因是受兩套不同的啟動子終止子調控的,但在同一質粒載體上,則標記表達只說明質粒的轉導效率。
目標基因和標記基因的表達一般指蛋白表達(除非轉基因的目標是miRNA等非蛋白物質),從而檢測的金標準是蛋白檢測,Western blotting或免疫螢光測定等。
3樓:數星星的青蛙
說實話,你的問題我基本沒看懂。所以順便說點。首先構建的載體中的標記基因一般分兩種。
一種是抗性基因,一種是螢光蛋白表達基因。它們的作用不是為了證明你的質粒中含有你的目的基因。而是單純的證明你做的轉化實驗或者轉染實驗成功與否。
而要驗證你構建的載體是不是含有目的基因,通常也是倆辦法。做單雙酶切和直接測序。所以,總的來講,標記基因不能證明你的目的基因的存在,測序才是金標準。
在基因工程中既然檢測出細胞可以表達相應的蛋白質為什麼還要在分子水平上檢測基因是否插入?
yang 檢查的時間點不一樣呀,總不能做到最後直接看蛋白有沒有吧,沒有咋辦,從頭再來?DNA一般是做質粒的時候檢測吧,這時候實驗剛剛開始,測了不行,重來的成本很低呀 rna應該是轉染以後測吧,qpcr怎麼也比western快一些吧,而且萬一western沒區別,你說你是沒轉進去呢還是沒表達呢?實驗需...
對於人類而言,人工智慧(AI)與生物基因工程哪個更危險?
地球好危險 我覺得是人工智慧。我們人類,一方面想方設法地讓機器擁有自由意志,另一方面又處心積慮地把自己的同胞變成俯首帖耳的機器。等到N年之後,地球上,或者太陽系中,有思想 有意志 敢說出真話 能創造出藝術的 物 就只有機器了呀! Bill Han 這兩個領域我都不算專家,甚至都是連真理的貝殼都沒有發...
構建表達載體,連的T載轉大腸桿菌,但是每次塗板都長了,菌液PCR驗證就是沒有陽性,為什麼啊?
徐相傑 瀉藥。是這樣的,T載體本身在做的時候,去載體去磷可能本身就沒有去好,這樣即使你沒有片段插進去,也是可以自連的。如果你用的takara的pmd19T之類的T載體,插入片段需要加A尾的,另pmd19T載體本身2700bp,太大的片段是很難連線上去的。如果你用的是些中國產的T載體,不太需要加A尾,...