1樓：Phy137
I say 高中生物很多都是形式主義，背個答案聽個樂呵，真有興趣，建議普生開始當課外書看，搞不好過個十年你就會在實驗室裡搬磚了【笑】
2樓：天道酬勤微生物
首先要搞清楚，cDNA，內含子，外顯子是幹啥的。
內含子：非編碼序列，可被轉錄，但在mRNA加工過程中被剪下掉，故成熟mRNA上無內含子編碼序列
外顯子：編碼序列，最後要翻譯成蛋白質的。mRNA生成以及加工過程中，都存在。
cDNA庫：簡單來說就是提取細胞內的mRNA，因為mRNA裡面沒有內含子（非編碼序列），逆轉錄成cDNA中也沒有了。
現在得到的cDNA中的序列都是有用的。所以不能酶切掉。雖然可能存在一些酶切位點。
那怎麼辦呢？怎麼和載體連線呢。
在PCR的時候要設計酶切位點，也就是在這段序列的兩端加上酶切位點的序列。再去PCR
然後酶切
當外源DNA與載體DNA都具有相同限制性內切酶識別位點，二者黏性末端互補，可以形成重組DNA分子。
3樓：Pat
答案胡說八道啊……
不對目標基因酶切的原因是，目標基因在你需要的位置大概率根本就沒有你需要的酶切位點。常用的酶切位點豐度很低。如果目標基因的兩端剛好有你需要的酶切位點，而內部又沒有被切斷的位點，為什麼不用？
基本沒聽說誰遇到過就是了。
如果酶切會改變「基因結構」，那你用引物在需要的位置引入了，還是一樣不能酶切，不然「基因結構」還是會改變。難道出題人以為內切酶會繞開你的「基因結構」，只切引物引入的位點？
另外，答案說引入BamHI和EcoRI位點，且不說根本不知道胰島素編碼區是否含有這兩個位點，這是什麼年代的質粒，把這兩個常用的位點包含到最常用的篩選標記裡面去……資本家不賺錢的嗎？
如果是你們老師出的題，乖乖聽老師的話，自己心裡明白就好了。如果是參考書，扔了吧。
4樓：燈火闌珊
基因的編碼部分分為外顯子和內含子，外顯子是編碼氨基酸，內含子不編碼氨基酸，外顯子轉錄為mRNA，以此為模板逆轉錄編碼DNA形成的DNA只包含外顯子，就是cDNA。直接沒切cDNA，破壞原有氨基酸編碼。
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