請問我用trizon法提取線蟲的rna,為什麼電泳跑膠沒有條帶,確認是按步驟一步步進行的?

時間 2021-05-29 23:54:36

1樓:Whelixy

可能性太多,沒法給你找原因,可能trizol買的有問題,可能組織沒有裂解好,可能沒有加RNA酶抑制劑,可能沒有在冰上操作,誰能說的清,又或者沉澱的RNA在洗的過程中被你誤吸掉了。所以你這樣的問題,只能讓回答者猜答案,並不能解決實際問題,建議去和本實驗室或者其他實驗室有經驗的同學學一下,觀摩一下,更容易解決

2樓:Chicagosale

電泳時,我們一般使用的染色劑比如EB啊,GEL-Red啊之類的,都是潛入DNA雙螺旋的分子間,所以能拿來作為結合染色染料。而對於RNA,其大多為單鏈形式存在,這些染料還能進行染色的原因,是因為其的大分子還能發生自身或相互間的2級纏繞,使得染料還有摻入的餘地。

那麼,如果這些大分子發生降級或者片段化成為小片段,發生自身纏繞的和相互聚合的機率及小了很多,染料難於摻入,當然不顯色。

而對於測OD值來說,我們關注的是其吸光度,吸光度這與RNA中的鹼基有關,與分子結構無關,所以當然能測出值來。並且,降解和片段化的程度越高,暴露出的鹼基愈多,吸光度也越大,測出的值當然也越高,這是不矛盾的。

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