螢光定量PCR是用來幹什麼的?

時間 2021-06-03 11:17:04

1樓:你好小仙女

在PCR反應體系中加入螢光基團,利用螢光訊號積累實時監測整個PCR程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析。隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,螢光訊號強度也等比例增加。我們實驗室用BIOG-PCR技術測得的擴增曲線起跳值一般在30左右,每經過乙個迴圈,收集乙個螢光強度訊號,這樣我們就可以通過螢光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條螢光擴增曲線圖。

2樓:

都回答的有問題,很簡單,就是螢光PCR比普通PCR更精準,因為普通PCR是一對引物只有兩個靶點,螢光PCR還多了一條探針,等於三個靶點都要匹配才可以發出螢光。另外螢光PCR比普通PCR檢測所需的模板更少,也就是說普通PCR可能要100核酸,螢光PCR可能10個核酸就可以。

另外由於是機器收集螢光,無需加樣,跑膠,染色,放入機器檢視等,更快,效率更高

3樓:陸夏製圖

qpcr我在這麼兩個地方用到:

乙個是看相對基因表達量。因為是定量嘛,所以能看出mRNA的相對表達量(比如兩種細胞的同乙個基因,哪個表達的多哪個表達的少)

還有乙個是看基因是純合還是雜合。養老鼠的時候時常碰到後代可能只有乙個染色體帶了某特殊基因也可能兩個都帶了,這種時候做普通的pcr然後看亮度相當不靠譜,一般我就qpcr了,帶乙個的ct是兩個的一倍

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