DNA 連線酶可以連線任意基因片段嗎？

1樓：伍小姐

酶的本質是催化劑，換句話說即使沒有這個酶，反應都有可能會發生，只是效率會有很大差別。只要兩個片段的介面是能對得上的（黏性末端互補配對，平末端無所謂）都可以連線在一起，只是效率高低的問題。所以甲乙丙丁如果是在條件允許的時候都能夠連線，但是順序嘛就要看他們的末端。

有時候做實驗連線效率不高，還會連線一些亂七八糟的片段或者自連，就會出現失敗，假陽性，空載等等。所以連線的特異性也不是十分強，尤其是平末端。至於為什麼不是完全按照我們想要的方式連線，原因也有很多，很難確定是哪乙個。

只能反覆做多幾次實驗了。。。

第一次回答問題，不好的地方請見諒！（臉紅。。。）

2樓：楠神

原則上來說，只要兩個片段的末端符合條件，連線酶都可以把它們連線起來。只不過有的連線後鹼基序列可能是不穩定結構(例如較長的相同重複鹼基對)，這樣它還是會斷裂。

3樓：冰室

我對T4 DNA連線酶比較熟悉。這種酶的特點是能催化DNA「縫隙」的磷酸化閉合。也就是說，DNA連線的前提是能夠讓要連線的位點靠得非常近（而且需要是雙鏈形態的，或者是部分單鏈）。

黏性末端因為有鹼基互補配對所以有利於較穩定過渡態的形成，但平末端本來相遇的概率就小，所以需要高濃度的酶和很長的孵育時間，酶才能有足夠的機會對它們進行連線。

更新首先要強調一下 DNA 連線酶在生物體中的作用並不是黏合片段而是「修補」片段。連線的作用只是在工程學中應用的結果。DNA 連線酶不能直接修補雙鏈斷裂，而需要和其它輔酶結合[1]，它最主要的作用是修補部分單鏈，也就是說修補缺了乙個口的雙鏈，像這樣的：

對於雙鏈斷裂來說 DNA 連線酶一次只能修補一邊，而不是像魔術一樣把兩條鏈「duang」地接在一起。這篇文獻[2]對 T4 DNA 連線酶的修補動力學有較好的記載，可供參考。