請問PCR跑出這種情況,應該怎麼解決

時間 2021-06-09 13:03:31

1樓:牛肉絲炒豬肉絲

你的問題都沒有描述清楚,怎麼幫你呢?你的實驗目的是什麼,是希望你要檢測的目的基因擴增出來還是擴增不出來(做基因表達抑制或者敲低的時候,Ct值是大比較好的)。這個PCR裡面是擴增定量多少個基因(絕對定量還是相對定量)?

如果是擴增乙個基因的話,那理論上融曲應該是單峰,而你是雜,多個峰的說明擴增的特異性不好(和引物有關),單峰但是峰高不一樣,說明樣品本底模板量不一樣。如果Ct都是比預期低的話,說明要麼PCR有問題,要麼反轉不完全。你看看是不是你qPCR的預變性時間不對(對於抗體熱起始的酶時間會長一點,5min;普通的可能只需要30s),這個要仔細看說明書,或者引物濃度弄錯了。

反轉有問題的話只能重新做一下反轉了

2樓:零式風扇

看不到具體的每個樣品的情況,比較亂只能簡單地說一下我看到的兩個問題

1.起峰時間太晚了,大部分樣品將近30個迴圈才起峰,效果很差

2.溶解曲線很亂,考慮存在非特異性擴增,和定量片段大小差異過大的問題。

這種情況應該怎麼調整自己

是可達鴨呀 乙個人過吧 低質量的社交和無底線的應付是沒有任何必要的,一定是害大於弊。乙個人吃飯,一邊吃一邊追劇很香呀 乙個人學習,也不會有打擾到你 乙個人走路,想停就停,想走就走 即使圈子很小,大學班上除了ta們也是有很多抬頭不見低頭見的陌生人啊,大家都是成年人了,無效社交就是真的無效呀。 小今歌 ...

請問以下這種情況,會計應該如何做賬?

yelaingr12 持續經營是基本假設。重新建賬是一回事,推倒重做是另外一回事。你要推了重做你得先申請清算,然後重新成立。每個科目核對明細和餘額,不對的地方調整到真實金額即可。舉個栗子,你老闆抽逃資金,然後以賬務混亂為由重建賬賬套。你覺得這個新賬套和之前的舊賬套是是乙個賬套嗎?乙個企業能有兩套帳嗎...

請問大家,我的這種情況,應該分手嗎

不知道 看你的情況感覺你男友是選個人相伴,對你沒有投入太多感情,愛得不夠。可能經濟上你也有點在乎,賬目上算得挺細的,感情也未到深處 情到濃時很多問題都不是問題。你們的問題是彼此愛得不夠。 天天天天 視覺 建議還是分了吧。什麼叫男孩子要窮養,但是他大了要對他好點?什麼叫要讓你多掙點錢?他不給你買,你不...