氨苄平板生長正常,液體培養基菌不生長,為什麼?

時間 2021-06-16 23:04:18

1樓:Pseudo

我猜你平板和菌液氨苄用的濃度是一樣的吧?一般菌液培養時用的抗生素濃度會比平板低(不只是氨苄,很多抗生素都是一樣),我會用1/3到1/2平板濃度這樣。液體培養基的抗生素如果用一樣濃度的話,經常遇到挑單菌落接種不長的情況。

這可能是因為在平板上菌落和含有抗生素的培養基接觸不充分,而且氨苄抗性的原理是質粒編碼β-內醯胺酶導致氨苄失活。所以平板篩選時菌落周圍氨苄濃度會降低,菌落內部的氨苄濃度則更低。如果同樣濃度的氨苄加在液體培養基中,接種進去的單菌落會一直處於較高濃度氨苄中,進而導致細菌被殺死。

接種0.2ml菌液菌可以生長,而單轉殖不生長,這個現象我也常遇到。下面是我的乙個猜想:

培養液中的氨苄濃度並不是恆定不變的,隨著時間的增加,氨苄會被菌產生的β-內醯胺酶降解,而氨苄自身也不是很穩定,也會自發降解一部分。這樣菌液中的氨苄濃度其實是不斷下降的。接種0.

2ml菌液相對於單轉殖菌落,接種的菌數量要多很多,這就意味著當菌液中氨苄濃度降到可以讓菌生長的濃度時,0.2ml接種管中的菌有更多機會存活然後復甦生長;而單轉殖接種管中可能所有的菌都已經被殺死了,也就沒有了生長的機會。當然0.

2ml接種管中氨苄濃度下降的速度可能會比較快,這也是因為更高的接種量導致其中β-內醯胺酶濃度更高。