你在做PCR的時候遇到過哪些有趣的事情?

時間 2021-06-09 18:14:44

1樓:

昨天晚上放電泳蓋子的時候,學姐跑來和我說話,她還有六天考研,以前我我一做實驗就能準確判斷我的行蹤來找我聊天順便看看操作問題,最近備考太忙,偶爾來。然後她來和我說話,我們聊的非常愉快 ,我順手蓋了蓋子,結果插了電的沒蓋蓋子,蓋的蓋子沒插電,白白跑了半小時。

2樓:咦咦噓噓

假陰性,只要是新提取的核酸,內源基因就時而假陰性,時而又能檢出,就算檢出,其CT值也偏大,知道核酸提取環節有問題,排查了好一段時間,實驗室消毒、更換所有耗材、移液器擦拭、核酸提取儀消毒、水浴鍋換水……最後花了一下午把移液器全拆成乙個個零件,乙個個零件清洗,密封零件和活塞零件重新抹上矽脂,PCR才恢復正常。

3樓:五兒

設迴圈的時候把前一步設在裡面了,乙個pcr做了好幾小時,還一直問人怎麼這麼久制膠的時候TAE和瓊脂比例搞錯了,加熱了就變成一塊很硬的,還覺得奇怪去問師兄,師兄說你這棒槌呢還有稀釋溶液的時候永遠都要問一下師兄,不然總怕搞錯

4樓:甲方乙方

跑電泳過程中,本是去看看樣品跑到哪了,突然看見了幾條淺淺的綠色螢光(大白天),不知道是不是看花了,喊同事來看,他們仔細看也能看見。核酸電泳做的不多,以前沒發現這種情況。

5樓:欣貝萊合成生物

其實有趣的事情也不少,但是也只有自己在做實驗的時候才會感覺到某個點比較有趣。比如制膠的時候,制膠完成結果完全吧把這塊膠給忘了,過了幾天去看的時候已經變成了「乾屍」,讓人哭笑不得。或者是在完成跑膠前的點樣時,發現制的膠完全是漏的等等。

這其實都算是一些操作上的失誤,但卻沒有造成什麼嚴重的後果,所以可以被拿來當做談資。但是大家在做實驗的時候一定要專心致志,說不定會有意想不到的結果呢。

欣貝萊~盛

6樓:Frank Lee

帶過本科分子生物學實驗課,裡面充滿了各種有趣,不光是PCR的。

講講我個人的吧:

1、當時用兩對引物對兩個模板P兩個片段,P了整整乙個月,各種引數都調整了,還是無果。結果有一天導師告訴我引物給我拿反了。。。。

2、當時做PCR用的矽膠蓋子,某日做完PCR後開啟PCR儀,發現產物不見了?!以為是別人幫我收起來了,問遍了實驗室一圈,逐個冰箱找了一輪還是沒發現。心想是不是有人給我搞鬼?

然後。。。。。發現PCR管粘在熱蓋上。。。。

3、各種管子插在冰上,然後冰盒被別人拿了,之後從水槽裡找回來的。。。。

4、膠電泳時放的時候底面朝上,點了樣漏了個精光。

還有各種。。。。有空再續

7樓:Jane Li

用自來水配過膠,跑出來花的。膠放久了,跑出來條帶是v字形或中空的。加96孔常加錯,想哭。槍不准,加到最後發現配的體系不夠……

8樓:

都是很久以前的事了

比如把Marker 當成了 loading buffer 加進去,跑出來一堆帶,但是機智的我仍然通過比較確定了我自己的目的帶。

比如配膠的時候忘了加染料,只好估摸著帶的位置滴上去染,優秀的我,仍然看到了帶(可能膠槽裡也有很少的染料,其實後邊染也是可以的)。

比如用的八連排管子和蓋子不是從同一家買的,擴完了個個都煮幹了(早些年加甘油不會煮幹現在機器有熱蓋都不加甘油了),怎麼甘心就這麼放棄呢,當然是加了水和一和,繼續跑膠。沒出來東西,估計酶什麼的早就煮成幹了。

比如qPCR,板子放反了,但是機器上設定的還是記憶中的樣子,記得右半邊沒有,這些孔clear掉,跑完開啟的那一刻,天吶,,,從此以後學了個能,你以為clear了程式會快一點嗎並不會,所以不要輕易動他,讓他採集所有資訊後期再處理,應該是你選擇他而不是被他選擇。

9樓:Field T

比如以前用中國產八連排管PCR,P完出來發現乙個管化了漏了,啥也不剩。

比如到跑膠前突然想起來自己的膠是用dd水配的。。。

比如之前做轉殖老出問題。實驗室師兄分析完技術因素之後悄悄告訴我,just keep in mind,我們用的taq酶是老闆讀PhD的時候純化的。。。。

泡膠忘了marker,電極插反了20分鐘回來看膠乾乾淨淨。。。。現在回看自己就像是慈父看著傻孩子學走路。

希望我不會再更新這個回答了

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