1樓：源井生物
以下是基因編輯細胞的操作：通過病毒法，化學轉染法或電轉法將gRNA和Cas9轉入細胞中，根據轉染方法不同進行不同時長的藥篩，藥篩完成後挑菜單轉殖培養。選擇不同的轉殖分別進行靶位點擴增及測序驗證，篩選出基因敲除的陽性轉殖。
2樓：徐相傑
基因編輯其實就是兩點:一切，二修復。切，在早期基因編輯中是利用基因組不穩定隨機斷裂,此中方法效率低，最近用核酸酶切割胞內某段基因組，前幾年的talen,最近的Crispr ,本質都是一種核酸酶。
修復的話，主要就是斷裂的基因組細胞會把它修復，修復中可能會修復錯了，可能修復對了，修復錯的時候就會導致基因組的序列發生變化，進而實現基因編輯。瀉藥。
3樓：小鬼星雲
基因編輯意味著能夠人為改造遺傳物質，特別是對特定片段的敲除、加入等，與基因工程有一些類似之處。當前，最搶眼的基因編輯技術就是CRISPR/Cas9了，CRISPR就是clustered regularly interspaced short palindromic repeats，即成簇規律性間隔重複序列。
CRISPR是由短的（大概20~50鹼基對(bp)左右）DNA重複序列形成的斷續結構組成的，這部分存在回文（回文指的就是12321,2378732,AGTTCCTTTCCTTGA這樣的結構，進化上形成高度回文的序列，可作為一種保護基因免遭遺傳漂變和突變轟炸的策略，在人類的Y染色體上就發現了9個大規模（可長達百萬pb）回文結構）排布，重複序列之間被25~70鹼基對左右的非重複序列隔開。重複的部分和間隔的部分分別稱為重複序列(repeats)和間隔序列(spacer)，此外參與CRISPR構成的還有乙個具有類似啟動子的前導(leader)序列。CRISPR-Cas系統存在於至少40%的細菌和90%的古生菌中，是細菌用以記憶、識別和抵抗噬菌體的系統。
而正是它能夠修改遺傳物質，進而將病毒基因從自己的基因組內踢出的能力引起了注意。Cas就是CRISPR-associated sequence即CRISPR關聯序列，它是由好幾個與CRISPR相關的基因組成的序列。
不過，CRISPR/Cas9並不是唯一的基因編輯技術。在此之前還出現過鋅指核酸酶(zinc-finger nucleases)和轉錄啟用因子樣效應核酸酶(transcription activator-like effector nucleases)等，這兩種基因編輯技術，題主可自行了解，這裡就只介紹CRISPR/Cas(9)系統（技術）了。
CRISPR/Cas系統最初是日本人在研究一種E.coli蛋白的時候發現的，2023年才被Jansen命名。它有I，II，III三種型別，型別I廣泛分布，在Cas3（一種核酸酶）的參與下降解外源DNA；型別II只在細菌中發現，由Cas9（也是核酸酶）參與，型別III還分A,B兩種亞型，比較複雜，它們則似乎是古生菌特有的。
在它們當中，Cas9最容易技術化（因為它單獨行動，無需跟其他核酸酶合作），所以就有了CRISPR/Cas9技術（當然，還是經過了改造以後才得來的）。
細菌在識別外源序列（如何識別，細菌當然自有策略）以後，Cas蛋白就會出動。Cas9蛋白質的身上有兩個部分(Ruv和HNH)，相當於「剪刀」，被用來切割DNA（當然是先與之結合，把自己固定在目標DNA上，再大刀闊斧地進行切割），這兩個部分分別負責一條鏈（這種快速而簡單的切割方式，正是它受到青睞的原因），即便因為這兩個部分發生突變失去切割能力（這樣的Cas9就叫做dead Cas9簡稱dCas9），Cas9依然可以在sgRNA介導之下，通過與靶基因結合，阻斷它的轉錄或者乾脆使之無法轉錄。如果覺得不夠直觀，可以見下圖。
其他Cas蛋白複合物會負責割取目標DNA的一些小段，作為間隔序列插入到自己的CRISPR部分，就實現了對外源DNA的記憶，但又不至於受到損害。如果同類噬菌體再度入侵，相應的CRISPR序列迅速轉錄生成pre-crRNA(即crRNA前體)，Cas複合體與另外一種RNA(tracrRNA)作用剪下這個前體，生成crRNA，(是不是與hnRNA最終被剪下成mRNA有異曲同工之妙？)crRNA與前兩者形成複合體，就可以識別和剪下與crRNA互補的位點。
（在細胞中，其實一部分機制與此類似的阻礙（調節）蛋白質合成的DISC即RNA誘導沉默複合體，也能幫助免疫系統相對脆弱的昆蟲和植物抵抗病毒。）
那麼實驗人員是怎麼改造Cas9的呢？其實介紹了細菌體內CRISPR/Cas9的功能，它的技術改造就很好說了。上面提到crRNA在形成後與tracrRNA與Cas9形成三聚複合體。
但是事先，tracrRNA和crRNA會結合成二聚體。然而在細胞裡，需要稍作改變。我們必須設計一種sgRNA代替這種二聚體，與Cas9形成另外一種二聚體。
這種sgRNA是從宿主細胞的意義上來說的，以為它必須與靶基因匹配，才能使Cas9順利行使切割功能。然後，還需要乙個用來定位的裝置，那就是核定位訊號。無需準備修復策略，因為細胞本身自有辦法。
(詳細的技術機制，我有時間再寫。)
但是由於這是一項新興技術，所以它還存在諸多缺陷，包括無法避免因種間差異而引發的效率挫傷，脫靶之類，所以還需更多改進。
當然，在這篇回答裡我可能講得還不是很清楚。你可以看一看我寫的一篇文章：
杜瑾鴻：核酸的剪刀——CRISPR/Cas
參看文獻：
Ishino, Y., Shinagawa, H., Makino, K.
, et al. (1987) Nucleotide sequence of the iap gene, responsible for alkaline phosphatase isozyme conversion in Escherichia coli, and identification of the gene product. Journal of Bacteriology,169, 5429-5433.
Jansen, R., Embden, J.D.
, Gaastra, W., et al. (2002).
Identification of genes that are associated with DNA repeats in prokaryotes. Molecular Microbiology, 43, 1565-1575
Wei, C.X., Liu, J.
Y., Yu, Z.S.
, et al. (2013) TALEN or Cas9-rapid, efficient and specific choices for genome modifica[1]tions. Journal of Genetics and Genomics, 40, 281-289
現在連原子都能進行操作，為什麼還基因編輯還會脫靶？
因為目前廣泛採用的幾種基因編輯技術並非以原子為單位進行操作。至於為什麼呢？因為現在操縱原子的研究試驗 注意我用了研究試驗這個詞，因為操縱原子這件事還沒有在實際生產中得到應用，甚至還沒有在除了操縱原子本身之外的其他研究中作為乙個研究工具得到應用 的侷限性很大，目前只能在高真空中在平面上進行 而基因編輯...
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愛店家天貓入駐 天貓店鋪具體怎麼操作?商家自己入住天貓的話首先就要了解入駐天貓的相關的條件是有哪些，了解了之後就要準備相關的資質材料了，相關的材料準備好之後，就可以去提交入駐天貓的相關的申請了，提交之後商家就要等待審核的結果，之後就是店鋪上線 簽訂合同的事情了。入駐天貓的難點主要有哪些?入駐天貓的難...
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